تعداد نشریات | 20 |
تعداد شمارهها | 360 |
تعداد مقالات | 2,962 |
تعداد مشاهده مقاله | 3,779,743 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 2,554,014 |
Efficient Induction of Embryogenic Callus and Biolistic-Mediated Transient Transformation in CP57-614 Cultivar of Sugarcane (Saccharum officinarum L.) | ||
Iranian Journal of Genetics and Plant Breeding | ||
مقالات آماده انتشار، پذیرفته شده، انتشار آنلاین از تاریخ 24 تیر 1403 | ||
نوع مقاله: Research paper | ||
شناسه دیجیتال (DOI): 10.30479/ijgpb.2024.19760.1364 | ||
نویسندگان | ||
Soheila Matroodi1؛ Mostafa Motallebi* 2؛ Amir Mousavi2؛ Esmat Jourabchi2 | ||
1Khorramshahr University of Marine Science and Technology, Abitaleb Blvd, Khorramshahr, Khuzestan, Iran, | ||
2National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology (NIGEB), Shahrak-e Pajoohesh, Tehran-karaj Highway, Tehran, Iran. | ||
تاریخ دریافت: 18 دی 1402، تاریخ بازنگری: 23 تیر 1403، تاریخ پذیرش: 24 تیر 1403 | ||
چکیده | ||
This study was carried out to optimize the conditions of embryogenic callus induction and transformation of CP57-614 cultivar of sugarcane by particle bombardment. Explants from young leaves were cultured on Murashige and Skoog (MS) modified medium containing varying concentrations of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) (1 mg/L, 2 mg/L and 4 mg/L), and two concentrations of Dicamba (4 mg/L and 6 mg/L). The maximum percentage of callus induction was obtained from the supplemented medium with 2 mg/L 2,4-D. Genetic constructs containing the uidA gene under the control of CaMV35S, ubiquitin and actin1 promoters used for bombardment of the somatic tissues. The impact of various biological, physical, and DNA parameters was assessed by histochemical GUS assay to quantify and compare the number of blue spots. This investigation determined the optimal conditions for achieving transient expression of the uidA gene in embryogenic calli as follows: the calli were bombarded at a pressure of 1100 psi, with a target distance of 6 cm, gold particles measuring 1 μm in size, coated with 1 μg of DNA, applying a vacuum pressure of 25 inHg. Additionally, the best osmotic pretreatment included a solution containing 0.2 M sorbitol and 0.2 M mannitol. Notably, higher expression rate was observed when the construct carrying the ubiquitin promoter was employed. The enhanced expression rates indicated that the ubiquitin promoter was more effective than other promoters tested in the experiment. | ||
کلیدواژهها | ||
Sugarcane؛ calli؛ particle bombardment؛ gene expression | ||
عنوان مقاله [English] | ||
القای کارآمد کالوس جنین زا و ایجاد تراریختی موقت با استفاده از روش زیست پرتابی در رقم CP57-614 نیشکر (Saccharum officinarum L.) | ||
نویسندگان [English] | ||
سهیلا مطرودی1؛ مصطفی مطلبی2؛ امیر موسوی2؛ عصمت جورابچی2 | ||
1دانشکده علوم دریایی، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر | ||
2پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران. | ||
چکیده [English] | ||
این مطالعه به منظور بهینه سازی شرایط القای کالوس جنین زا و تراریختی رقم CP57-614 نیشکر با بمباران ذرهای انجام شد. ریزنمونههای برگهای جوان بر روی محیط کشت تغییر یافته موراشیگ و اسکوگ حاوی غلظتهای مختلف -2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) (1، 2 و 4 میلیگرم در لیتر) و دو غلظت Dicamba(4 و 6 میلی گرم در لیتر) کشت شدند. حداکثر درصد القای کالوس از محیط حاوی 2 میلی گرم در لیتر2,4-D بدست آمد. سازوارههای ژنتیکی حاوی ژن uidA تحت کنترل پروموترهای CaMV35S ، ubiquitin و actin1 برای بمباران بافتهای سوماتیک استفاده شدند. تأثیر پارامترهای مختلف بیولوژیکی، فیزیکی و DNA با استفاده از روش هیستوشیمیایی GUS برای کمی کردن و مقایسه تعداد لکههای آبی مورد ارزیابی قرار گرفت. این بررسی شرایط بهینه را برای دستیابی به بیان گذرای ژن uidA در کالوس های جنین زا تعیین کرد. شرایط بهینه شناسایی شده به این شرح بود: کالوس ها در فشار psi 1100، با فاصله هدف 6 سانتی متر، ذرات طلا به اندازه 1 میکرومتر، پوشش داده شده با 1 میکروگرم DNA ، اعمال فشار خلاء 25 اینچ جیوه بمباران شدند. علاوه بر این، کالوس ها با استفاده از محلولی حاوی 0.2 مولار سوربیتول و 0.2 مولار مانیتول تحت پیش تیمار اسمزی قرار گرفتند. قابل ذکر است، هنگامی که سازه حامل پروموتر ubiquitin استفاده شد، نرخ بیان بالاتری مشاهده شد. نرخ بیان افزایش یافته نشان داد که پروموتر ubiquitin موثرتر از سایر پروموترهای مورد بررسی قرار گرفته در این آزمایش بود. | ||
کلیدواژهها [English] | ||
نیشکر, کالوس جنین زا, زیست پرتابی, بیان ژن | ||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 78 |